VetExpert: помощь в диагностике инфекций и инвазий каждый день

Вы заботитесь о пациентах, мы заботимся о вас

ОСОБЕННОСТИ МЕТОДА И ПРАВИЛА ПРИМЕНЕНИЯ
ИЛИ ЧТО ВАЖНО ПОМНИТЬ
О ТЕСТАХ VETEXPERT
Если вы не нашли здесь то, что искали, напишите нам, и мы постараемся найти необходимую информацию.

ОСОБЕННОСТИ РАЗНЫХ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ, ОСНОВАННЫХ НА ПРИМЕНЕНИИ ТЕСТ-СИСТЕМ
Введение
Обнаружить возбудителей инфекций и инвазий в организме, в его секретах и экскретах возможно только при помощи специальных методов тестирования биологического материала.

Процесс тестирования заключается в выявлении в биологическом материале либо антигена - специфичного белка возбудителя (ИХА, ИФА), либо антител, которые вырабатывает организм в ответ на появление возбудителя (ИФА, ИХА), либо консервативных участков генома, т.е. ДНК или РНК возбудителя (ПЦР).

Поэтому методы ИХА И ИФА используют для диагностики не только инфекций, но и инвазий, например, выявления кровепаразитов или сердечных червей, поскольку микроскопия, применяемая при таких инвазиях, не только малоэффективна сама по себе, но и отбор биологического материала для исследования нередко представляет значительный риск для пациента.

Сравним несколько диагностических методов, используемых в практической ветеринарии (и медицине человека), основанных на применении тест-систем для обнаружения антигенов и антител или участков генома.

В основе этих методов лежат тест-системы разных производителей, отличающиеся показателями достоверности (специфичность, чувствительность, наличие-отсутствие кросс-реакций с другими возбудителями), прочие отличия касаются типов устройств, в которых осуществляется работа тест-системы, количеством этапов исследования, стоимостью оборудования и сложностью подготовки персонала, мобильностью и т.д.
ПЦР-диагностика
Полимеразная Цепная Реакция
  • Тип устройства – анализатор; реагенты необходимо приобретать по мере расходования.
  • Оборудование основное - амплификаторы, дополнительное - флуоресцентные детекторы, устройства для проведения электрофореза.
  • Метод - полимеразная цепная реакция: обнаружение антигена в любом биологическом материале.
  • Тип анализа - качественный: регистрирует наличие в пробе ДНК или РНК определенного возбудителя вне зависимости от его титра и жизнеспособности, в том числе в очень малой концентрации.
  • Длительность выполнения исследования: несколько часов.
  • Оценка результата: визуальная, по флуоресцентным меткам.
  • Обязательно наличие отдельного помещения и стерильного бокса в лаборатории, а также специально подготовленного персонала.
  • Влияние внешних факторов на достоверность результата: при нарушении требования стерильности помещений ПЦР-лаборатории и одежды персонала очень высока степень вероятности ложноположительных и ложноотрицательных результатов, обусловленная контаминацией проб.
Организация и использование результатов требует хорошего знания особенностей метода ПЦР-диагностики. (ссылка на раздел Особенности ПЦР-диагностики)
rt-ПЦР-диагностика
Полимеразная Цепная Реакция
в реальном времени (real time)

  • Тип устройства – анализатор; тест-системы необходимо приобретать по мере расходования. Оборудование: амплификаторы со специализированным программным обеспечением и флуоресцентным детектором.
  • Метод - полимеразная цепная реакция в реальном времени: обнаружение антигена в любом биологическом материале.
  • Тип анализа: количественный: регистрирует количество определенного антигена в пробе вне зависимости от его титра.
  • Длительность выполнения исследования: несколько часов.
  • Оценка результата: автоматическая регистрация и интерпретация полученных данных. Обязательно наличие оснащенной лаборатории и специально подготовленного персонала.
  • Влияние внешних факторов на достоверность результата: при нарушении требования стерильности помещений ПЦР-лаборатории и одежды персонала очень высока степень вероятности ложноположительных и ложноотрицательных результатов, обусловленная контаминацией проб.
ИФА: ELISA
ИммуноФерментный Анализ
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay
  • Тип устройства – многолуночный планшет с набором компонентов.
  • Оборудование: а) полуавтоматический анализатор, термостат, качалки; б) автоматический анализатор.
  • Метод - иммуноферментный анализ (ИФА): позволяет обнаружить антиген или антитела в сыворотке или плазме крови.
  • Тип анализа - количественный: результат - числовое значение титра антигена или антител. Обязательно наличие лаборатории и специального подготовленного персонала.
  • Длительность выполнения исследования: 2...5 часов.
  • Оценка результата: для адекватной интерпретации полученных из лаборатории результатов анализа врачу необходимо пройти специальную подготовку.
  • Влияние внешних факторов на достоверность результата полифакторное: температура, влажность, освещенность, качество воды, используемой для разведения буфера, наличие окислителей в окружающем воздухе, условия инкубации; очень важна точность исполнения каждого этапа исследования.
ИХА
ИммуноХроматографический Анализ
  • Тип устройства – индивидуальная тест-кассета с набором компонентов.
  • Метод - иммунохроматографический анализ (ИХА): обнаружение антигена или антител в любом биологическом материале.
  • Тип анализа – качественный, полуколичественный: регистрирует титры антигена или антител, соответствующие наличию патологического инфекционного или инвазионного процесса в организме; количественный: регистрирует титры антител, соответствующие низкому, среднему или высокому уровню и иммунного статуса.
  • Универсален: предназначен для работы в кабинете приема, вне клиники (на выезде к пациенту), в лаборатории вне зависимости от оснащенности.
  • Длительность выполнения исследования: 5...10 (иногда - до 20) минут при комнатной температуре не ниже +15оС, 5...20 минут при температуре ниже +15оС.
  • Оценка результата - визуальная.
  • Специальной подготовки врачей и персонала лабораторий не требует, достаточно точного следования инструкции.
  • Влияние внешних факторов на достоверность результата: методика разработана таким образом, что на реакцию кроме температуры (ниже +2оС или выше +30оС: искажение результата, от +2оС до +15оС: относительное замедление реакции) не влияют никакие другие факторы.
True simplicity is derived from so much more than just the absence of clutter and ornamentation.
Образец назальных выделений
1. Проведите санацию полости носа (удалите слизь).
2. Извлеките из индивидуальной упаковки имеющийся в наборе VetExpert тампон, увлажните его обычным физиологическим раствором.
3. Тампон на несколько секунд введите в ноздрю параллельно нёбу.
4. Медленно извлеките тампон вращательным движением, прижимая его к нижней внутренней поверхности носа.
Образцы из обеих ноздрей возьмите одним и тем же тампоном.
Мембраны комплексных тестов (с двумя, тремя, четырьмя мембранами) обособлены также, как в тестах с одной мембраной: на каждой из мембран происходят независимые иммунохимические реакции.
Компоненты тест-системы кассеты и внутреннее устройство в области одной мембраны:
  • накладка для образца, на которую первоначально поступают раствор пробы и аналитический раствор (буфер);
  • конъюгатная накладка с адсорбированным конъюгатом наноколлоидного золота-хромогена - с антителами или белком А оболочки вируса;
  • мембрана с иммобилизованными в зоне теста и зоне контроля моноклональными /поликлональными антителами или рекомбинантным антигеном, на которой происходит фиксация иммунных комплексов;
  • абсорбентная накладка, впитывающая растворы на последнем этапе исследования.
Book design is the art of incorporating the content, style, format, design, and sequence of the various components of a book into a coherent whole. In the words of Jan Tschichold, "methods and rules upon which it is impossible to improve, have been developed over centuries. To produce perfect books, these rules have to be brought back to life and applied."
Front matter, or preliminaries, is the first section of a book and is usually the smallest section in terms of the number of pages. Each page is counted, but no folio or page number is expressed or printed, on either display pages or blank pages.
Made on
Tilda