VetExpert Heartworm Ag
Экспресс-тест для выявления Dirofilaria immitis: антигена дирофилярий / сердечных червей

Экспресс-тест VetExpert Heartworm Ag – твердофазный иммунохроматографический анализ для качественного обнаружения антигена Dirofilaria immitis

Сердечные черви (Dirofilaria immitis) - относительно крупные паразиты; взрослые особи обитают в сердце и легочной артерии пораженных собак. Заражение происходит через укусы комаров, которые переносят личинок дирофилярий здоровым собакам от больных. В некоторых географических районах с высокой численностью комаров сердечный дирофиляриоз является большой проблемой. Коммерческие тесты HW Ag в большинстве своем обнаруживают специфические антигены исключительно взрослых самок дирофилярий, чем обусловлен переменный успех их применения для диагностики сердечной инвазии. В настоящее время большинство коммерческих тестов способно точно обнаружить инвазию при наличии 3~5 (или более) половозрелых самок сердечных червей в возрасте 7-8 месяцев. Все тесты HW Ag не способны обнаружить циркулирующих в крови микрофилярий и неполовозрелых червей в сердце; большинство тестов не способны обнаружить единичные половозрелые экземпляры самок, инвазию исключительно из самцов, а также незначительную инвазию в случаях активного иммунного ответа организма хозяина.

Принцип: ИХА прямым сэндвич методом
Антитела против Dirofilaria immitis (связывание)<–> Dirofilaria immitis антиген в образце <–> Антитела против Dirofilaria immitis (обнаружение)

Назначение: Выявление антигена Dirofilaria immitis

Образцы: сыворотка или плазма крови собак

Время считывания: 5 - 10 минут

Чувствительность : 100% по сравнению с аутопсией

Специфичность : 100% по сравнению с аутопсией

Отсутствуют кросс-реакции с Dipetalonema reconditum, паразитами, переносимыми блохами и вшами, другими возбудителями заболеваний, подлежащих дифференциальной диагностике

Срок хранения: 24 месяца

Температура хранения : 2~30°C

Уникальная система антител Canine Heartworm Ag

Очень высокая точность : 100%

Очень высокая чувствительность: выявляет инвазию при наличии 1 половозрелого паразита

Максимальный интервал для интерпретации результата: 10 минут

Отличный индикатор для прогноза и коррекции терапии во время лечения зараженной Dirofilaria immitis собаки (ослабление интенсивности окрашивания тестовой линии указывает на сокращение паразитарной нагрузки)

Увеличивает диагностические возможности, в том числе редких и/или нетипичных для географической зоны, сложных для диагностики и/или ранее не диагностируемых заболеваний, помогает в принятии клинических решений

Экспресс-тест VetExpert Heartworm Ag прошел сравнительное исследование положительных и отрицательных образцов, подтвержденных клиническими признаками и методом золотого стандарта для Heartworm Ag: аутопсией.

Образцы сыворотки крови собак, всего 365:

1. Положительные: 111

2. Отрицательные: 254


Подтверждены 3 характеристики достоверности экспресс-теста VetExpert Heartworm Ag по сравнению с методом аутопсии: чувствительность 65/65x100%=100%, специфичность 102/102x100%= 100%, общая точность 100% (165/165).

Table 2. Сравнение чувствительности и специфичности разных коммерческих тестов с результатами аутопсии (опубликовано в AAVP, American Association of Veterinary Parasitologists)


1. Поместить цельную кровь в пробирку с EDTA

2. Закрыть пробирку, оставить до получения сырой сыворотки (не встряхивать) или

Закрыть пробирку, 5 раз перевернуть для смешивания крови и EDTA, передать в лабораторию для получения сыворотки или плазмы

3. Внести в лунку 2 капли сыворотки или плазмы

4. Интерпретация

Если у вас есть вопросы, напишите нам, указав почту для ответа

Возбудитель. Формы. Симптоматика. Дифференциальная диагностика

Возбудитель:Dirofilariа immitis (сердечные черви, Heartworm, CHW), cемейство Filariidae, класс Nematoda (круглые черви). Живородящие. Длина тела половозрелых гельминтов 25-30 см, микрофилярий - 0,22-0,29 мм.

Хозяинно-паразитарные отношения:окончательный хозяин - плотоядные млекопитающие, один промежуточный хозяин - кровососущие насекомые преимущественно семейства Culicidae.

Восприимчивы / (окончательные хозяева):  - собаки, кошки, болеют все представители семейства псовых (Canidae),  многие представители семейства кошачьих (Felidae),  хорьки, морские львы и другие животные (всего более 30 видов), известны случаи заражения человека

Источники / промежуточные хозяева: комары родов Aedes, Culex, реже Anofeles. 

Препатентный период: от момента заражения до половозрелой стадии паразитов и воспроизводства микрофилярий - 7...9 месяцев.  Патентный период обусловлен продолжительностью жизни взрослых червей - 5...7 лет. Микрофилярии (L1) в промежуточном хозяине выживают в течение 2-х лет. 

Сезонность:Заражение возможно преимущественно в теплый период года, что связано с жизненным циклом промежуточного хозяина; при температуре внешней среды ниже 140С созревание личинок паразитов в теле комаров практически прекращается, и риск заражения в зимние месяцы  даже в южных регионах невысок. Однако в условиях городских домов с теплыми и влажными подвальными помещениями возможна передача инвазии в течение всего года комарами Culex molestus.

Путь передачиинокулятивный, со слюной комара

Путь проникновения в организм: кожные покровы.

Локализация:взрослые черви: легочная артерия, аорта, каудальная вена, сердце (правый желудочек и правое предсердие, трехстворчатый клапан), легкие; личинки-микрофилярии: кровеносное русло.

Цикл развития:  Комар вместе с кровью инвазированного окончательного хозяина заглатывает личинок Dirofilaria immitis (microfilariae первой ювенильной стадии, L1).  В мальпигиевых сосудах комара микрофилярии (L1)  превращаются в личинок  второй стадии (L2),  а затем  в L3, которые из пищеварительного тракта выходят в полость тела (гемоцель). Период развития паразитов в организме комара от  микрофилярии  до инвазионной личиночной стадии (L3) составляет 10-16 дней и зависит от внешних условий. Чем выше температура и относительная влажность окружающей среды, тем этот этап короче. Паразиты стадии L3  с гемолимфой проникают в слюнные железы комара в момент, когда насекомое пронизывает хоботком кожу окончательного хозяина (например, собаки) и выплескиваются вместе с “лужицей” слюны на поверхность кожи. После извлечения комаром хоботка, через образовавшуюся колотую рану L3 проникают в тело окончательного хозяина. С этого момента от 0 до 14 дней проходит до линьки L3 в четвертую личиночную стадию (L4) в окончательном хозяине. Паразиты на стадии L4 мигрируют к базальным мембранам мышц и в подкожную ткань, где в течение некоторого времени находятся в состоянии покоя. После очередной линьки образовавшиеся личинки пятой стадии (L5) мигрируют через стенки кровеносных сосудов в кровоток и пассивно достигают каудальных легочных артерий и сердца окончательного хозяина. Здесь происходит последний этап превращения - L5 во взрослых паразитов, после чего нематоды мигрируют в правый желудочек сердца и легочную артерию (на 85-120 день от момента заражения). В течение следующих двух месяцев черви достигают половозрелости, при наличии червей обоих полов происходит оплодотворение, через некоторое время самки отрождают микрофилярий в кровь хозяина, и начинается новый жизненный цикл паразитов. Полный жизненный цикл Dirofilaria immitis составляет от 7 до 9 месяцев

Патогенетические факторы:Механический: а) травматизация стенок сосудов хозяина в процессе активной миграция личинок  через прямой контакт паразитов со стенками артерий и аорты вызывает изменения эндотелия с развитием ворсинчатой пролиферации; б) обструкция кровотока живыми или мертвыми паразитами. Токсический: продукты метаболизма паразитов, поступающие в кровь хозяина, оказывают агрессивное воздействие на среды, клетки и ткани.

На начальном этапе постепенно нарастают симптомы: мягкий глубокий кашель, усиливающийся в процессе или после физических нагрузок; вялость, апатичность, потеря веса, иногда кровь при кашле

В патогенезе решающую роль играют нарушение кровотока и развитие хронической правосторонней СН, развитие эндокардита, миокардита и пролиферативного легочного эндартериита, легочной эмболии и гипертрофии правого желудочка. Так же важно развитие кавального синдрома, приводящее к гемолизу, гемоглобинурии, билирубинемии, желтухе, анорексии и коллапсу. Развитие гломерулонефрита обусловлено циркуляцией в кровотоке большого количества иммунных комплексов, образующихся в результате связывания неспецифических и специфических антител с антигеном D. immitis. При дальнейшем прогрессировании заболевания развиваются эхокардиографические явления: изменение камер сердца - проявляется расширением правого желудочка и правого предсердия, увеличение конечного диастолического объема и нарушение работы левого желудочка. Возможен выпот в плевральную и/или брюшную полость. 

Классификация дирофиляриоза по степени выраженности симптомов

Класс 1:  Без клинических признаков или возможен мягкий глубокий кашель, усиливающийся в процессе или после физических нагрузок
Класс 2: Средне-умеренная симптоматика: периодические приступы сердечной и дыхательной недостаточности
Класс 3: Умеренно-тяжелая симптоматика: вялость, эндокардиты, гломерулонефриты, коагулопатии и т.д
Класс 4: Тяжелая симптоматика: отек легких, полисистемные тромбозы, портокавальный синдром, асцит, парез тазовых конечностей, неврологические нарушения т.д.

Дифференциальная диагностика

Патологии сердечно-сосудистой, дыхательной систем, хроническая и острая печеночная и почечная недостаточность. При средней и высокой степени инвазии дирофиляриоз приводит к полиорганным нарушениям, поэтому в дифференциальную диагностику следует включать поражения кожи, суставов, нервной системы.  

Использованы материалы : http://www.vetmed.wsu.edu/depts-vcpl/drugs.aspx.

Диагностика

В обследование на Dirofilaria immitis в обязательном порядке необходимо включать имуунохроматографический анализ на выявление антигена взрослых червей и микроскопическое исследование крови на выявление микрофиляремии. В случае выявления микрофилярий в периферической крови: ИХА тест необходим для дифференциальной диагностики Dirofilaria immitis и Dirofilaria repens. В случае выявления антигена Dirofilaria immitis: исследование на наличие микрофилярий необходимо для оценки тяжести состояния животного, выбора и корректировки соответствующего лечения, прогноза

Для оценки степени тяжести состояния животного обязательно проведение лабораторных (биохимия, клиника крови, коагулограмма) и инструментальных (рентген, УЗИ, ЭХОкг) исследований (ниже приведена классификация состояний).

Оценка риска тромбоэмболических осложнений. Риск тромбоэмболических осложнений в процессе лечения животного с положительным результатом ИХА - с половозрелыми формами D. immitis - связан с возможной обструкцией кровотока в легочной артерии мертвыми Heartworms.

Низкий риск тромбоэмболических осложнений

Клинические симптомы дирофиляриоза отсутствуют. Данные R-графии грудной клетки в норме. Содержание антигена в крови низкое (тестовая полоса “VetExpert Heartworm Ag” окрашена слабо), либо антиген в крови не обнаружен (тестовая полоса”VetExpert Heartworm Ag” не окрашена -  отрицательный результат) при наличии микрофилярий, что означает отсутствие половозрелых червей D. immitis. Выявление микрофилярий в крови при отрицательном ИХА тесте на D. immitis дает право утверждать, что пациент поражен  D. repens. При ЭХОКГ паразитов не обнаружено. Возможность ограничить физическую активность собаки имеется.

Показания: Симптоматическая терапия. Микрофилярицидная терапия. Макрофилярицидная терапия

Высокий риск тромбоэмболических осложнений

При наличии хотя бы одного из следующих данных анамнеза и клинического обследования:  Клинические симптомы дирофиляриоза имеются - кашель, правосторонняя СН, обмороки, асцит – скопление жидкости в брюшной полости. ПриR-графии грудной клетки патология выявлена. Содержание антител в крови высокое (тестовая полоса окрашена ярко, по интенсивности окраски приближается к контрольной). При ЭХОКГ обнаружены гельминты. Имеются сопутствующие заболевания – поражение печени, почек, нервной системы, сердечная / дыхательная недостаточность

Показания: Симптоматическая терапия. Микрофилярицидная терапия. Макрофилярицидная терапия при классах поражения 1,2,3. При классе поражения 4 – исключительно хирургическое извлечение паразитов.  

Очень важно перед проведением терапии, направленной на уничтожение половозрелых особей, стабилизировать состояние пациента.

В комплексной терапии, направленной на уничтожение имаго и личинок, показано назначение антибиотиков (тетрациклин) для уничтожения вольбахий - бактерий, позитивно влияющих на жизнедеятельность дирофилярий.

Микрофилярицидные средства

“Ивомек” 6-12 мг/кг. “Баймек” 6-12 мг/кг. “Новомек” 6-12 мг/кг. “Диронет” 6 мкг/кг (эффективность по данным ряда авторов сомнительна). “Мельбимакс” 1 раз в 3 месяца. 

Симптоматическая терапия

Подготовка к медикаментозному уничтожению половозрелых особей. Цель: Ослабление клинических проявлений заболевания.

Схема 1: Мочегонные (“Фуросемид” 1мг/кг, 2 раза в день). Ингибиторы АПФ (“Ренитек”, “Энап”, “Вазотоп”). Инотропные агенты (“Дигоксин”). Антиаритмическая терапия.

Схема 2: “Преднизолон” 2 мг/кг, 1 раз в день. “Ренитек” 0,5 мг/кг, 1 раз в день. “Фуросемид” 5 мг, 2 раза в день. “Верошпирон” 6 мг, 1 раз в день.

Для симптоматической терапии рекомендуют применять те группы фармацевтических веществ, которые необходимы конкретному пациенту в случае развития симптомокомплексов полиорганных нарушений и секундарных инфекций: кардиопротекторы, антидепрессанты и нейролептики, противомикробные, иммунодепрессанты, противоопухолевые антиэстрогены, стимуляторы дофаминовых рецепторов и др.

Этиотропная / Макрофилярицидная терапия - уничтожение половозрелых особей

В настоящее время существует 2 препарата, одобренных FDA для использования у собак для элиминации взрослых Heartworms. Оба препарата являются органическими соединениями мышьяка. 1) “Melarsomine dihydrochloride” (“Immiticide” Merial), воздействует только на взрослых D. Immitis; дозировка 2,5 мг/кг, способ применения: инъекция глубоко внутримышечно в поясничную мускулатуру. 2) “Thiacetarsamide sodium” (“Caparsolate” ®; Merial), для внутривенного введения. Одна из принятых схем терапии с применением  “Меларсомина гидрохлорида” (“Иммитицида”) напрямую связана с классификацией состояния пациента, основанной на тяжести проявления клинических признаков, принятой для выбора лечебных мероприятий, доз и схем введения препаратов, для минимизации побочных действий препаратов и токсического воздействия гельминтов. При инвазии низкой и средней степени рекомендована стандартная схема. При инвазии относительно высокой степени рекомендовано двухэтапное лечение (снижает риск тромбоэмболии). При инвазии высокой степени рекомендовано исключительно хирургическое лечение. 

Сравнительная таблица симптомов различных форм Чумы плотоядных...


Использованы материалы: Дубровина Е.В. Автореферат: “Клинико-морфологические изменения чумы у собак индивидуального сектора в условиях города”

Вирусные инфекции: парвовироз, аденовироз, коронавирусный энтерит, лептоспироз, болезнь Ауески, инфекционный гепатит, бешенство, пироплазмоз. Бактериальные инфекции: сальмонеллез, пастереллез, токсоплазмоз. Инвазии: некоторые гельминтозы. Неинфекционные патологии: токсическое поражение (отравление) гиповитаминоз В1, тирозинемия.


Подтверждение эффективности терапии: двукратное ИХА-тестирование на антиген через 3 и 6 месяцев.  Вывод об излечении делают, если  ОБА результата отрицательны.

Обрабатывать необходимо всех животных в эндемичных районах, начиная с 6-7 месячного возраста, послепредварительного ИХА тестирования на наличие антигена Dirofilaria immitis.

Профилактические средства: “Адвокат” / 1 раз в месяц.  “Стронхолд” / 1 раз в месяц. “Скалибор” ошейник, для защиты от комаров. “Мильбимакс” / 1 раз в 3 месяца.

Одна из рекомендуемых схем работы с пациентом:  

1) Исследование на Dirofilaria immitis: экспресс-тест “VetExpert Heartworm Ag” на антиген половозрелых червей и микроскопия крови на микрофилярий; при отрицательных результатах переходим к фармакологической профилактике. Периодичность повторных исследований в период проведения профилактических  обработок – 1 раз в 6 месяцев.

2) Фармакологическая профилактика: Этап 1. «Мильбемакс» (“Milbemax”, Novartis), однократно. Этап 2. «Интерцептор» (“Interceptor”, Novartis), в течение 2-3 мес. Необходимое количество повторов этапов 1 и 2 зависит от длительности периода возможных контактов с переносчиками – комарами (в большинстве случаев – периода теплого времени года). 

^ Наверх